Полимеразная цепная реакция, сокращенноПЦРна английском языке — это метод молекулярной биологии, используемый для амплификации определенных фрагментов ДНК.Его можно рассматривать как особую репликацию ДНК вне организма, которая может значительно увеличить очень небольшое количество ДНК.В течение всегоПЦРВ процессе реакции жизненно важную роль играет один класс веществ – ферменты.
1. Так ДНК
В экспериментах первых днейПЦР, ученые использовали ДНК-полимеразу I Escherichia coli. Но с этим ферментом есть проблема: каждый раз при выполнении цикла ему необходимо пополнять новый фермент, что немного усложняет этапы операции и его трудно полностью автоматически амплифицировать.Эта проблема была решена после того, как в 1988 году ученые случайно выделили ДНК-полимеразу Taq из Thermus aquaticus. С тех пор автоматическая амплификация ДНК стала реальностью.Открытие этого фермента также делаетПЦРтехнология удобная, практичная и универсальная технология.В настоящее время ДНК-полимераза Taq является наиболее распространенной полимеразой в наборах ДНК.
2. ПфуДНК
Как упоминалось выше, в ДНКазе Taq есть большая ошибка, поэтому ученые в определенной степени модифицировали ДНК-полимеразу Taq, чтобы избежать неспецифической амплификации из-за несоответствия, приводящей к неточным результатам испытаний.Но модификация ДНК-полимеразы Taq может ингибировать активность ДНК-полимеразы при комнатной температуре.PfuDNA-полимераза вполне может компенсировать вышеуказанные недостатки ДНК-полимеразы Taq, так что реакцию ПЦР можно проводить нормально и можно эффективно повысить вероятность успешной амплификации целевого гена.
3. Обратная транскриптаза.
Обратная транскриптаза была открыта в 1970 году. Этот фермент использует РНК в качестве матрицы, dNTP в качестве субстрата, следует принципу спаривания оснований и синтезирует одноцепочечную ДНК, комплементарную матрице РНК в направлении 5'-3'.Обратная транскриптаза в первую очередь зависит от активности ДНК-полимеразы из матриц ДНК или РНК и, следовательно, не обладает 3'-5'-экзонуклеазной активностью.Однако он обладает активностью РНКазы H, что в определенной степени ограничивает длину синтеза обратной транскриптазы.Из-за низкой точности и термостабильности дикой обратной транскриптазы ученые также модифицировали ее.
ДляПЦРэкспериментов, основные расходные материалы: индивидуальная пробирка для ПЦР, пробирка для ПЦР на 4/8 полосок, планшеты для ПЦР.
ЛабиоРасходные материалы для ПЦРиметь следующеепреимущества:
ПЦР-планшеты: Широкая совместимость с термоциклерами;Высокая контрастность, легкая идентификация лунок;хорошее отражение флуоресценции;хорошеетеплопередача;Сертифицированные ингибиторы ДНКазы, РНКазы, ДНК, ПЦР и проверенная апирогенность.
Индивидуальные пробирки для ПЦР: Устойчив к испарению;хорошийтеплопередача;отличная оптическая прозрачность; сертифицированные ингибиторы ДНКазы, РНКазы, ДНК, ПЦР и проверенная апирогенность.
Пробирки для ПЦР на 4/8 стрипов: Ультратонкие стенки, высокая прозрачность, хорошее отражение флуоресценции;может использоваться в фармацевтической промышленности, пищевой промышленности и молекулярной биологии; высококачественный чистый полипропиленовый материал; сертифицированные ингибиторы ДНКазы, РНКазы, ДНК, ПЦР и проверенные апирогены.
Время публикации: 9 июня 2023 г.