Центрифужная пробирка — это простая пробирка, которая может выдерживать высокую скорость вращения и давление, например, для разделения некоторых образцов и отделения надосадочных осадков.Пробирка центрифуги для ультрафильтрации состоит из двух частей, аналогичных внутренней и внешней трубкам.Внутренняя трубка представляет собой мембрану с определенной молекулярной массой.Во время высокоскоростного центрифугирования вещества с меньшей молекулярной массой будут просачиваться в нижнюю пробирку (т. е. во внешнюю пробирку), а вещества с большей молекулярной массой будут задерживаться в верхней пробирке (т. е. во внутренней пробирке).Это принцип ультрафильтрации, который часто используется для концентрирования проб.
Центрифужные пробирки для ультрафильтрации обычно можно использовать без предварительной обработки, но для обработки образцов белка, особенно для разбавленных растворов белка (< 10 мкг/мл), скорость восстановления концентрации с помощью ультрафильтрационных мембран часто не является количественной.Хотя материалы PES сводят к минимуму неспецифическую адсорбцию, с некоторыми белками, особенно в разбавленном виде, могут возникать проблемы.Степень неспецифического связывания варьируется в зависимости от структуры отдельных белков.Белки, содержащие заряженные или гидрофобные домены, с большей вероятностью необратимо связываются с различными поверхностями.Предварительная пассивационная обработка поверхности ультрафильтрационной центрифужной пробирки может уменьшить потерю адсорбции белка на поверхности мембраны.В большинстве случаев предварительная обработка колонки перед концентрированием разбавленного раствора белка может улучшить скорость восстановления, поскольку раствор может заполнить пустые участки адсорбции белка, открытые на мембране и поверхности.Метод пассивации заключается в предварительном погружении колонки в больший объем пассивирующего раствора на срок более 1 часа, тщательном промывании колонки дистиллированной водой, а затем центрифугировании ее один раз с дистиллированной водой для полного удаления пассивирующего раствора, который может остаться на пленке. .Будьте осторожны, не позволяйте пленке высохнуть после пассивации.Если вы захотите использовать его позже, вам необходимо добавить стерильную дистиллированную воду, чтобы пленка оставалась влажной.
Центрифужные пробирки для ультрафильтрации обычно не подлежат стерилизации и повторному использованию.Поскольку цена одной пробирки недешева, многие люди пытаются использовать ее повторно — опыт заключается в многократной очистке поверхности мембраны дистиллированной водой и центрифугировании один или два раза.Небольшую пробирку, которую можно центрифугировать в обратном направлении, можно погрузить в дистиллированную воду, а затем центрифугировать в обратном направлении большее количество раз, что будет лучше.Его можно использовать повторно для одного и того же образца, а когда он не используется, его можно замачивать в дистиллированной воде, но при этом необходимо предотвращать бактериальное загрязнение.Не смешивайте разные образцы.Некоторые люди говорят, что замачивание в 20% спирте и 1н растворе NaOH (гидроксид натрия) может предотвратить рост бактерий и предотвратить высыхание.Пока ультрафильтрационная мембрана проникает в воду, ей нельзя допускать высыхания.Однако другие говорят, что это разрушит структуру мембраны.В любом случае производители обычно не поддерживают повторное использование.Повторное использование заблокирует размер пор мембраны фильтра и даже вызовет утечку жидкости, что повлияет на результаты эксперимента.
Время публикации: 05 сентября 2022 г.